PRUEBA RAPIDA DE HIV 1/2. Ultima Generación en Diagóstico Rápido

Las pruebas de diagnóstico inmediato de VIH entregan resultados dentro de aproximadamente 20 minutos después de la toma de una muestra.  Estas pruebas han sido diseñadas para llevarse a cabo en presencia del paciente, de manera rápida y simple, sin la necesidad de contar con un equipo de laboratorio. Los resultados se entregan en sólo una visita del paciente, eliminando la necesidad de seguir la pista de aquellos pacientes que no cumplen con regresar a la clínica, reduciendo el número de las citas de pacientes que serían necesarias, evitando la necesidad del transporte de las muestras y reduciendo de manera potencial la ansiedad asociada con la espera por un resultado de VIH. Las personas que tienen un alto riesgo de contraer la infección por VIH, en particular aquellas que son difíciles de localizar, tienen mayor probabilidad de presentarse y someterse a una prueba donde se usan pruebas rápidas para detección de VIH. La disponibilidad rápida de un resultado también significa que la prueba de diagnóstico inmediato tiene ventajas en ciertas situaciones; por ejemplo, para las mujeres embarazadas que presentan un parto. Las Pruebas Rápidas también pueden ser beneficiosas para las personas que presentan profilaxis post-exposición.

Los estudios previos indicaron que la prueba rápida para la detección de VIH de OraQuick^Ò demuestra un desempeño clínico que es comparable con el EIA convencional.  Estos estudios han reportado sensibilidades y especificidades de entre un 99.6 a100% respectivamente.   En muchos estudios de pacientes positivos al VIH las sensibilidades observadas fueron del 100%.  En un pequeño estudio que evaluó la sensibilidad por subtipos, la prueba de OraQuick^Ò mostró sensibilidad idéntica (100%) para todos los subtipos de VIH que fueron sometidos a prueba (A-G). Se ha reportado una reducción de la sensibilidad en aquellos pacientes que están experimentando seroconversión en respuesta a la terapia anti retroviral altamente activa (HAART)^.

Los estudios previos que demostraron la utilidad y el desempeño de la prueba rápida para la detección de VIH de OraQuick^Ò indican que ésta es una alternativa preferida respecto de la prueba convencional de laboratorio en muchos escenarios. En consecuencia, la disponibilidad de las pruebas rápidas tales como la Prueba para la Detección de anticuerpos de VIH 1/2 de OraQuick^ÒADVANCEÔ representa una herramienta adicional muy importante en la batalla contra la epidemia por VIH, a través de una mayor identificación y cuidado de las personas infectadas con VIH así como la reducción de la transmisión de la enfermedad.

Riesgo de Preeclampsia. Diagnóstico al Primer Trimestre de gestación

La Pre-eclampsia (PE) es caracterizada por malfuncionamiento placentario e involucra hipertensión y proteinuria, entre otras afecciones fetales o de la gestación. Si no es tratada a tiempo la paciente puede desarrollar Eclampsia y causar muerte materna, fetal y neonatal. A nivel mundial, se estima que la PE afecta anualmente entre 2-7% de los embarazos y es responsable en un 0,5% de los casos en los que debe culminarse la gestación antes de la semana 34 de gestación.

La etiología indica que factores genéticos e inmunológicos están involucrados. Las condiciones de riesgo asociadas a la madre son: primera gestación, intervalo entre gestaciones, condición hipertensa de la paciente, obesidad, enfermedades como diabetes, enfermedad de riñón, artritis reumatoide, lupus o escleroderma, edad materna menor a 25 años y mayor a 35 años. Para el padre son: primera vez que va a ser padre, gestaciones previas con PE de una pareja. Para el feto, las condiciones que más afectan son: gestación multifetal, hidrops/triploidia y mola hidatidiforme.

Aunque la PE realmente se evidencia en el tercer trimestre de gestación, comienza a desarrollarse desde el primer trimestre y sus causas aún permanecen poco claras; sin embargo, el síndrome puede ser identificado en etapas iniciales por medio de marcadores bioquímicos específicos presentes en la circulación periférica materna, aún incluso antes de presentarse los síntomas. Dichos marcadores bioquímicos son: la PP13 (Proteína Placentaria 13) y el PIGF (Factor de Crecimiento Placentario). En gestaciones afectadas ambos marcadores presentan niveles considerablemente bajos durante el primer y el segundo trimestre.

Diagnóstico Preventivo Neonatal.

Los Errores Innatos del Metabolismo son relativamente raros (su incidencia es de 1/2000 nacimientos o menor), pero su aparición puede tener profundas consecuencias sobre la salud y el desarrollo del niño. Carentes de diagnóstico y tratamiento temprano, los niños afectados pueden desarrollar severo retraso mental, incapacidades físicas de diverso grado y extensión o, incluso condiciones crónicas potencialmente mortales que requerirán frecuentemente de exhaustivos y costosos cuidados médico especializados, y el consecuente soporte financiero para mantenerlo.

No obstante, su detección oportuna permite desarrollar procesos terapéuticos frecuentemente asociados a dietas estrictas, que han mostrado ser de suma efectividad en varios de estos desórdenes. Ello por sí mismo acentúa la necesidad de establecer la obligatoriedad del diagnóstico preventivo sobre un panel amplio de estos desórdenes antes de los dos primeros meses de vida del niño.

Desórdenes mas frecuentes:

1.- Galactosemia (GALT), Incidencia: 1:14.000-1:60.000. La falta de tratamiento para este desorden causa problemas severos en el desarrollo infantil y, en los peores casos, la muerte. Puede obtenerse la remisión de los síntomas mediante una dieta libre de galactosa.

2.- Fenilcetonuria (PKU), Incidencia: 1:14.000-1:60.000. De no existir medidas terapéuticas, es causa de retraso mental severo. En contraste, una dieta restringida en fenilalanina permite al niño un desarrollo normal

3.- Hipotiroidismo Congénito (TSH y T4), Incidencia: 1:3.000-1:6.000. Su diagnóstico debe ser realizado en un lapso de 3 a 5 cinco días tras el nacimiento. Sin tratamiento, el niño desarrollará retardo mental severo.

4.- Hiperplasia Congénita Adrenal (17-OHP4), Incidencia: 1:10.000-1:15.000. Constituye un grupo de desórdenes, incluyendo algunos de consecuencias potencialmente fatales. No obstante, en cualquier de sus manifestaciones, los tratamientos disponibles contribuyen grandemente al beneficio del paciente.

5.- Fibrosis Quística (IRT), Incidencia; 1:2.000-1:2.500. Es caracterizada por afecciones obstructivas pulmonares de tipo crónico, infecciones de las vías respiratorias y anormalidades gastrointestinales. Su detección temprana puede mejorar significativamente la calidad de vida de los pacientes.

6.- Deficiencia de Biotinidasa, Incidencia: 1:60.000. La carencia de biotinidasa afecta la regeneración de la biotina, así como el metabolismo de las carboxilasas mitocondriales. Sus síntomas incluyen desórdenes dérmicos, daños cerebrales y neurales, retardo mental. Su tratamiento: dosis diarias de biotina permiten un desarrollo normal.

7.- Deficiencia de Glucosa-6-fosfato dehidrogenasa (G6PD), Es uno de los desórdenes neonatales mas conocidos. En US tiene una incidencia de 0.6-2.9% y en algunas naciones alcanza hasta el 26%. Las personas afectadas (entre 200 y 400 millones de personas) son sensibles a drogas antimaláricas, sulfas y dosis altas de vitamina C. Estas sustancias pueden iniciar un stress oxidativo, caracterizado por fatiga, taquicardia e inflamación del vaso. En neonatos e infantes, puede observarse además la presencia de bilirrubina no conjugada en el cerebro, lo cual podría resultar en severo retraso mental o la muerte.

Detección e Identificación de Hemoglobinopatías por IEE (Iso Electro Enfoque) usando el Sistema Resolve e Isoscan Systems para resultados mas precisos y sencillos de analizar

La existencia de mas de 700 variantes de la molécula de la hemoglobina a nivel mundial, derivadas de la combinatoria genética característica de las distintas poblaciones y su movilidad creciente, permite suponer cuan inesperada puede ser la aparición de trastornos derivados de alteraciones estructurales en este componentes sanguíneo de consecuencias detrimentales e, incluso mortales.


Las hemoglobinopatías pueden ser identificadas a nivel neonatal mediante el estudio electroforético de las variantes de esta molécula en muestras de sangre de cordón, mediante isoelectroenfoque. Cada afección presenta un patrón característico de importancia tanto como herramienta diagnóstica como para asesoría en el área de genética humana. La detección de hemoglobina S, C y E (Hb Sm Hb, C y Hb E), es particularmente importante por cuanto cada una de esas variantes, bajo status homocigoto, produce efectos clínicamente significativos. Adicionalmente, la evidencia de esas variantes como dobles heterocigotos (Hb SC, Hb SE), produce también estados patológicos.


La electroforesis de hemoglobina se ha convertido en un método valioso también para establecer el porcentaje de Hb S en pacientes afectados por anemia falciforme, cuyas terapias incluyen frecuentes transfusiones de sangre. Tratamientos tempranos con antibióticos en estos casos han permitido disminuir la incidencia de infecciones asociadas a esta enfermedad.

Espectrometría de masas tandem y su empleo en el tamiz neonatal e infantil

En los años 1990 ocurrió la introducción de una herramienta analítica poderosa en laboratorios de tamiz neonatal. Esta herramienta, llamada espectrometría de masas tandem (MS/MS), permitió un gran avanzo en el área, una vez que permitió detectar un gran numero de enfermedades metabólicas en un único proceso, través el análisis de muestras de sangre en papel filtro colectadas del tallón de neonatos. La MS/MS permitió no solamente la consolidación de métodos de detección de aminoacidopatías sino la ampliación del panel de enfermedades detectadas, incorporando el tamiz neonatal de defectos de oxidación de ácidos grasos (acilcarnitinas) y ácidos orgánicos. La MS/MS es capaz de analizar alrededor de 30 marcadores bioquímicos en aproximadamente 2 minutos, indicativos de 20 o más errores innatos del metabolismo, la capacitando como una herramienta imprescindible en los laboratorios de tamiz neonatal.


Resulta por demás considerable la investigación desarrollada de los niveles de aminoácidos y acilcarnitinas en neonatos y su relación con estos errores innatos del metabolismo dada la baja frecuencia en la cual estas afecciones se presentan, lo cual requiere extensas evaluaciones a nivel poblacional, decenas de miles de muestras, para colectar un volumen relevante de datos para un análisis estadístico fehaciente de la frecuencia de tales enfermedades en una población dada, así como la determinación de los rangos de concentración de estos metabolitos correspondientes a neonatos normales o afectados.

Metodologías basadas en sistemas compactos de espectrofotometría de masas capaces de evaluar de cientos de muestra diarias, optimizados para la investigación de estos desórdenes, ha permitido un efectivo abordaje de este proceso a nivel de programas de diagnostico preventivo establecidos en diversos países.


Estos sistemas, cuya robusta y consistente tecnología requiere poco o ningún ajuste y mantenimiento, han provisto la capacidad para cuantificar marcadores bioquímicos potencialmente asociados a mas de 25 diferentes errores innatos del metabolismo, incluyendo aminoacidopatías (PKU, MSUD), y desórdenes del metabolismo de ácidos grasos (MCAD, LCHAD). Igualmente, permiten la detección y cuantificación de niveles endógenos de aminoácidos, acilcarnitinas y compuestos relacionados en sangre de neonatos colectada en papel de filtro a razón de menos de dos minutos por muestra.


A nivel del infante, es importante monitorear los niveles de esteroides por cuanto sus niveles afectan me manera considerable su adecuado crecimiento y desarrollo. Comúnmente los esteroides evaluados en el infante son Testosterona, Cortisol, Corticosterona, Dehidroepiandrosterona, Progesterona, Androstenediona, Deoxicortisol, 17 alfa hidroxiprogesterona, Aldosterona y sulfato de Dehidroepiandrosterona.

Diagnóstico molecular: genómica constitucional por arrays (aCGH)

La técnica de citogenética molecular aCGH permite el análisis del genoma, mostrando cambios en la estructura y en el número de copias con alta resolución, detección de ganancias y pérdidas de material genético en regiones específicas del genoma, que ofrece ventajas sobre las técnicas tradicionales. Las variaciones en el número de copias de genes pueden ocurrir en un número de diferentes enfermedades y tumores, y puede ser indicativo de alteraciones en los oncogenes y genes supresores de tumores.


La detección de las alteraciones en el número de copias de determinadas regiones del genoma aportará una contribución importante a la asociación entre los defectos moleculares y fenotipos estudiados. Esta técnica ha sido capaz de revelar anomalías cromosómicas no identificadas por el análisis citogenético tradicionales porque la resolución del aCGH es alta, alrededor de 650kb.


Puesto que no hay necesidad de cultivo celular, se hace más rápido y en menos de dos días se obtiene el resultado. El ADN de interés y ADN de referencia se extraen y se comparan. La necesidad es sólo 2μg de ADN de una variedad de materiales tales como sangre, líquido amniótico, tumor sólido material fresco o congelado y material en parafina también pueden ser utilizados.


Por otra parte, la plataforma BAC'S-on-BEADS es un ensayo múltiple, diseñado para detectar aneuploidías de 5 cromosomas (13, 18, 21, X e Y) y las ganancias y las pérdidas en nueve bien caracterizado regiones que no pueden ser detectados con cariotipo tradicional. El BoB’s constitucional es una técnica simple y robusta, con beneficios significativos como la facilidad del aplicación, reducción del tiempo de resultados y las mejoras en la detección de cambios en genoma en el Luminex.

Salud fetal y materna: marcadores bioquímicos del riesgo fetal

El Cálculo de Riesgo Fetal, considerado en forma integral con las evaluaciones clínicas y el control periódico de la gestación, proporciona un factor de seguridad adicional, así como un importante nivel de información crítica tanto para el médico como para la familia. De allí que se hayan diseñado dispositivos de atención diagnóstica que permitan establecer ésta práctica como rutina dentro del esquema de seguimiento médico provisto en cada embarazo, independientemente del nivel presuntivo de riesgo que pudiere asignarse en función de la edad.


La determinación prenatal de riesgo asociado a problemas cromosómicos y defectos de Tubo Neural se basa en la medición de marcadores bioquímicos en sangre materna y marcadores ecográficos durante el Primer y el Segundo Trimestre de gestación. Los marcadores bioquímicos evaluados en el primer trimestre son: PAPP-A y hCGb libre, utilizados junto con el valor de Trasnlucencia Nucal (TN) y la existencia del Hueso Nasal; mientras que para segundo trimestre los mejores marcadores bioquímicos a utilizar son: AFP, hCGb libre y uE3. Todos estos valores se combinan para generar un Cálculo de Riesgo Integrado que puede aportar hasta un 98% de confiabilidad en el resultado, siempre que el especialista que realiza la medición de la TN esté debidamente certificado por los organismos competentes ya que se ha evidenciado una diferencia de hasta un 35% en la confiabilidad de los resultados entre especialistas acreditados y no acreditados.


Estudios realizados señalan que la secreción fetoplacental de la Proteína Plasmática Asociada a la Placenta (PAPP-A) es el marcador individual de mayor relevancia clínica en lo que al cálculo de riesgo de Síndromes de Down y Edwards se refiere, mostrando bajos niveles en sangre materna durante las semanas 8-13 de gestación, conjuntamente con la de hCGb libre. En igual forma, el parámetro de mayor relevancia para la determinación de defectos de tubo neural a nivel gestacional consiste en la Traslucencia Nucal (semanas 11-13) y más recientemente la presencia o ausencia del Hueso Nasal (NB) para Síndrome de Down.


Por otra parte, la expectativa clínica en caso de gestaciones afectadas con Síndrome de Down es la disminución de los niveles séricos de AFP y uE3 con la edad gestacional, mientras la hCGb libre muestra niveles duplicados en gestaciones afectadas con éste Síndrome.